無菌室要這樣管理！

一、無菌室的要求:

1，需要建立無菌室的管理制度。

2.保持良好的衛(wèi)生:相對濕度為40%-60%，溫度為2-22℃，最好安裝空調(diào)。
3、無菌室不得進(jìn)行其他工作，不得進(jìn)入非操作使用的東西，不得保管檢查后的馀地。
4、紫外燈的使用期限一般為300小時，記錄使用時間，到期更換。

二、無菌微生物室操作和要求

以菌落總數(shù)、大腸菌群為例演示無菌實驗流程。消毒實驗臺、手、檢查用具(保證無菌環(huán)境和無菌實驗用品)，微生物的理想環(huán)境是無菌的，但要保護自己。防護服，口罩手套必須佩戴。

對實驗臺面進(jìn)行擦拭消毒，一般75%乙醇或新潔爾溶液。為了保持無菌，對容易殘留細(xì)菌的部位進(jìn)行消毒處理。實驗臺上的藥品、裝樣品的箱子等實驗用工具必須進(jìn)行消毒處理。實驗前檢查培養(yǎng)基的檢查、無菌條件下稱為樣本1)實驗前檢查大腸菌群培養(yǎng)基的量、導(dǎo)氣管內(nèi)是否有氣泡。2)打開超凈臺風(fēng)扇，在無菌、空氣緩慢流動的狀態(tài)下工作。3)進(jìn)行無菌稱呼，這一步最好戴手套。4)接種針滅菌5)接種試管口滅菌6)取菌，接種或向培養(yǎng)盤內(nèi)倒培養(yǎng)基時，試管口或瓶壁外不得接觸盤底，試管或瓶口應(yīng)傾斜通過火焰。總結(jié)微生物實驗室工作人員，必須有嚴(yán)格的無菌觀念，許多實驗要求在無菌條件下進(jìn)行，主要原因之一是防止實驗操作中人為污染樣品，二是保證工作人員安全，防止檢測出的病原菌操作不當(dāng)造成個人污染。要求如下:

三、無菌室的使用和管理要求

2.室內(nèi)采光面積大，從室外可以看到室內(nèi)情況。無菌室管理你不得不知道的事

3.為了保證無菌室的清潔，無菌室周圍需要設(shè)置緩沖走廊，在走廊旁邊設(shè)置緩沖間，其面積可以小于無菌室。

4.無菌室、緩沖走廊和緩沖間設(shè)置日光燈和消毒空氣用紫外線燈，殺菌紫外線燈離工作臺1米為宜，其電源開關(guān)應(yīng)設(shè)置在室外。

5.無菌室和緩沖間的出入口應(yīng)設(shè)置拉門，門窗平整，門縫應(yīng)密封，兩扇門應(yīng)錯開，以免空氣對流污染。

6.無菌室的使用和管理；
(1)無菌室應(yīng)保持清潔，室內(nèi)只保管酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環(huán)等必要的檢查用具。不要放置與檢查無關(guān)的東西
(2)室內(nèi)檢查用具和長椅等保持固定位置，不要隨意移動。
(3)每2~3周用2%的煤酸水溶液擦拭桌子、門、窗、桌子、椅子和地板，用3%的煤酸水溶液噴霧消毒空氣，最后用紫外線燈殺菌30分鐘。
(4)定期檢查室內(nèi)空氣無菌情況，細(xì)菌數(shù)控制在10個以下，發(fā)現(xiàn)不符合要求時，應(yīng)立即徹底消毒滅菌。無菌室無菌程度的測定方法:取普通肉湯瓊脂平板，改良馬丁培養(yǎng)基板各3個(平板直徑均為9厘米)，放置無菌室各工作場所，打開蓋子露出30分鐘，倒置培養(yǎng)，細(xì)菌總數(shù)設(shè)置37℃溫箱培養(yǎng)48小時細(xì)菌和霉菌的總數(shù)不得超過10個。
(5)無菌室殺菌前，將所有物品放在操作部位(待檢查物例外)，打開紫外線燈殺菌30分鐘，時間到達(dá)，關(guān)閉紫外線燈待用。
(6)進(jìn)入無菌室前，必須在緩沖室更換消毒的工作服、帽子和鞋子。
(7)操作應(yīng)嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)定進(jìn)行，操作中少說話，不吵鬧，保持環(huán)境無菌狀態(tài)。設(shè)備和場所的滅菌消毒

四、微生物檢測用設(shè)備和場所必須進(jìn)行滅菌或消毒處理。

1.微生物實驗室規(guī)劃設(shè)計時，高壓蒸汽滅菌:工作服、口罩、稀釋液等，放置高壓滅菌鍋，一般在121℃滅菌30分鐘，當(dāng)然不同的培養(yǎng)基有不同的要求，必須分別處理。

2.火焰滅菌:接種針、接種環(huán)等可直接火焰滅菌。

3.高溫干燥滅菌:各種玻璃器具、注射器、吸管等，在干燥箱中160℃滅菌2小時。

4.一般消毒：無菌室內(nèi)凳子、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法消毒，必須用其他方法消毒處理，用2%的煤酸或來蘇兒水溶液擦拭消毒，工作人員的手也用這種方法消毒。

5.空氣消毒:打開紫外線燈照射30-60分鐘即可。
準(zhǔn)備工作

a、進(jìn)行無菌室空間消毒，打開紫外線燈30-60分鐘。
b.檢查用的相關(guān)器材，在搬入無菌室之前必須分別進(jìn)入滅菌消毒。
c.作業(yè)人員必須洗手消毒，穿無菌工作服、帽子和鞋子，進(jìn)入無菌室。
d.進(jìn)入無菌室后，再次消毒手部，進(jìn)行檢查操作。操作過程中的注意事項e、動作輕，不要太快，不要攪動空氣造成污染的玻璃器皿也要輕輕放置，不要破壞污染環(huán)境。
e.操作應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。
f.接種環(huán)、接種針等金屬器材使用前后必須燒毀，燒毀時首先通過內(nèi)炎，干燥殘留物后燒毀滅菌。
g.使用吸管時，不要用嘴直接吸管或吹管，而要用洗耳球操作。
h.觀察平板時不能打開蓋子。如果想接觸菌落檢查的話，必須接近火焰區(qū)域操作，平盤蓋也不能打開，上下蓋必須適當(dāng)?shù)卮蜷_縫隙。
i.染色可疑病原菌涂層時，請用夾子夾住玻璃片，不要用手直接拿著玻璃片，以免污染。使用的玻璃片也應(yīng)浸泡在消毒液中消毒后再洗。
j.工作結(jié)束后，收拾桌子上的樣品和器材，最后用消毒液擦拭桌子。

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